1. Cél: Ez az eljárás szabványosított eljárást kíván biztosítani az aszeptikus műveletekhez és a steril helyiségek védelméhez.
2. Alkalmazási kör: biológiai vizsgálólaboratórium
3. Felelős személy: Minőségellenőrzési felügyelő tesztelő
4. Meghatározás: Nincs
5. Biztonsági óvintézkedések
A mikrobiális szennyeződés megelőzése érdekében szigorúan aszeptikus módon kell műveleteket végezni; a kezelőknek a steril helyiségbe való belépés előtt ki kell kapcsolniuk az UV-lámpát.
6. Eljárások
6.1. A steril helyiséget steril műtővel és pufferhelyiséggel kell felszerelni. A steril műtő tisztaságának el kell érnie a 10000-es tisztasági osztályt. A beltéri hőmérsékletet 20-24°C között, a páratartalmat pedig 45-60% között kell tartani. A tisztaasztal tisztaságának el kell érnie a 100-as tisztasági osztályt.
6.2. A steril helyiséget tisztán kell tartani, és szigorúan tilos törmeléket felhalmozni a szennyeződés megelőzése érdekében.
6.3. Szigorúan kerülje az összes sterilizáló berendezés és táptalaj szennyeződését. A szennyezett személyeknek abba kell hagyniuk azok használatát.
6.4. A steril helyiséget működőképes fertőtlenítőszerekkel kell felszerelni, például 5%-os krezololdattal, 70%-os alkohollal, 0,1%-os klórmetionin oldattal stb.
6.5. A steril helyiséget rendszeresen sterilizálni és megfelelő fertőtlenítőszerrel tisztítani kell annak biztosítása érdekében, hogy a steril helyiség tisztasága megfeleljen a követelményeknek.
6.6. Minden műszert, eszközt, edényt és egyéb tárgyat, amelyet steril helyiségbe kell vinni, szorosan be kell csomagolni és megfelelő módszerekkel sterilizálni kell.
6.7. A steril helyiségbe való belépés előtt a személyzetnek kezet kell mosnia szappannal vagy fertőtlenítőszerrel, majd a pufferhelyiségben át kell öltenie speciális munkaruhát, cipőt, sapkát, maszkot és kesztyűt (vagy ismét meg kell törölnie a kezét 70%-os etanollal), mielőtt belépne a steril helyiségbe. A műveleteket baktériumkamrában kell elvégezni.
6.8. A steril helyiség használata előtt a steril helyiségben lévő ultraibolya lámpát besugárzás és sterilizálás céljából legalább 30 percre be kell kapcsolni, a tiszta munkaasztalt pedig egyidejűleg levegőbefúvás céljából be kell kapcsolni. A művelet befejezése után a steril helyiséget időben ki kell takarítani, majd 20 percig ultraibolya fénnyel kell sterilizálni.
6.9. Ellenőrzés előtt a vizsgálati minta külső csomagolását sértetlenül kell tartani, és a szennyeződés elkerülése érdekében tilos felnyitni. Ellenőrzés előtt 70%-os alkohollal átitatott vattakorongokkal fertőtlenítse a külső felületet.
6.10. Minden művelet során negatív kontrollt kell végezni az aszeptikus működés megbízhatóságának ellenőrzésére.
6.11. Bakteriális folyadék felszívásakor tapadókorongot kell használni. Ne érintse meg közvetlenül a szívószálat a szájával.
6.12. Az oltó tűt minden használat előtt és után lánggal kell sterilizálni. Lehűlés után a tenyészet beoltható.
6.13. A baktériumfolyadékot tartalmazó szívószálakat, kémcsöveket, Petri-csészéket és egyéb eszközöket 5%-os Lysol oldatot tartalmazó sterilizáló vödörbe kell áztatni fertőtlenítés céljából, majd 24 óra elteltével ki kell venni és le kell öblíteni.
6.14. Ha bakteriális folyadék kerül az asztalra vagy a padlóra, azonnal öntsön 5%-os karbolsavoldatot vagy 3%-os lysol oldatot a szennyezett területre legalább 30 percig, mielőtt kezelné. Ha a munkaruha és sapka szennyeződött baktériumos folyadékkal, azokat azonnal le kell venni, és nagynyomású gőzsterilizálás után ki kell mosni.
6.15. Minden élő baktériumot tartalmazó tárgyat fertőtleníteni kell, mielőtt csap alatt leöblítenék. Szigorúan tilos a csatorna szennyezése.
6.16. A steril helyiségben lévő telepek számát havonta ellenőrizni kell. Nyitott tiszta munkaasztal mellett vegyünk néhány 90 mm belső átmérőjű steril Petri-csészét, és aszeptikusan fecskendezzünk bele körülbelül 15 ml megolvasztott és körülbelül 45°C-ra hűtött táptalajt, agart. Megszilárdulás után fordítsuk fejjel lefelé 30-35°C-on. Inkubáljuk 48 órán át egy ℃-os inkubátorban. A sterilitás ellenőrzése után vegyünk 3-5 lemezt, és helyezzük őket a munkafelület bal, középső és jobb oldalára. A fedél kinyitása és 30 perces expozíció után helyezzük fejjel lefelé egy 30-35°C-os inkubátorba 48 órára, majd vegyük ki őket. Vizsgáljuk meg. A lemezen lévő különféle baktériumok átlagos száma egy 100-as osztályú tiszta helyiségben nem haladhatja meg az 1 telepet, és egy 10000-es osztályú tiszta helyiségben az átlagos szám nem haladhatja meg a 3 telepet. Ha a határértéket túllépik, a steril helyiséget alaposan fertőtleníteni kell, amíg az ismételt ellenőrzések nem felelnek meg a követelményeknek.
7. Lásd a „Gyógyszerhigiéniai ellenőrzési módszerek” és a „Kínai gyógyszerellenőrzési szabványos működési gyakorlat” című dokumentumok (Sterilitásellenőrzési módszer) fejezetét.
8. Értékesítési Osztály: Minőségirányítási Osztály
Tisztaszobai műszaki útmutató:
Miután steril környezetet és steril anyagokat szereztünk be, steril állapotot kell fenntartanunk ahhoz, hogy egy adott ismert mikroorganizmust tanulmányozhassunk, vagy funkcióikat kihasználhassuk. Ellenkező esetben különféle kívülről származó mikroorganizmusok könnyen keveredhetnek. A kívülről származó, irreleváns mikroorganizmusok keveredésének jelenségét a mikrobiológiában szennyező baktériumoknak nevezik. A szennyeződés megelőzése kritikus technika a mikrobiológiai munkában. A teljes sterilizálás egyrészt, a szennyeződés megelőzése másrészt az aszeptikus technika két aspektusa. Ezenkívül meg kell akadályoznunk, hogy a vizsgált mikroorganizmusok, különösen a kórokozó mikroorganizmusok vagy a természetben nem létező genetikailag módosított mikroorganizmusok, a kísérleti tartályainkból a külső környezetbe kerüljenek. Erre a célra a mikrobiológiában számos intézkedés létezik.
A steril helyiség általában egy kis helyiség, amelyet kifejezetten mikrobiológiai laboratóriumokban rendeztek be. Lemezekből és üvegből építhető. A terület nem lehet túl nagy, körülbelül 4-5 négyzetméter, a magasság pedig körülbelül 2,5 méter. Egy puffer helyiséget kell a steril helyiségen kívül elhelyezni. A puffer helyiség és a steril helyiség ajtaja nem nézhet ugyanabba az irányba, hogy megakadályozzuk a légáramlást, amely különféle baktériumokat hozhat be. Mind a steril helyiségnek, mind a puffer helyiségnek légmentesen záródónak kell lennie. A beltéri szellőztető berendezéseknek légszűrő berendezésekkel kell rendelkezniük. A steril helyiség padlójának és falainak simának, nehezen szennyeződőnek és könnyen tisztíthatónak kell lenniük. A munkafelületnek vízszintesnek kell lennie. Mind a steril helyiség, mind a puffer helyiség ultraibolya lámpákkal van felszerelve. A steril helyiségben az ultraibolya lámpák 1 méter távolságra vannak a munkafelülettől. A steril helyiségbe belépő személyzetnek sterilizált ruházatot és kalapot kell viselnie.
Jelenleg a steril helyiségek többnyire mikrobiológiai üzemekben találhatók, míg az általános laboratóriumokban tiszta padokat használnak. A tiszta pad fő funkciója a lamináris légáramlású eszköz használata a munkafelületről származó különféle apró porszemcsék, köztük mikroorganizmusok eltávolítására. Az elektromos eszköz lehetővé teszi, hogy a levegő áthaladjon a HEPA szűrőn, majd bejusson a munkafelületre, így a munkafelületet folyamatosan steril levegő áramoltatja. Ezenkívül a külső oldalon egy nagy sebességű légfüggöny található, amely megakadályozza a külső bakteriális levegő bejutását.
Nehéz körülmények között fából készült steril dobozok is használhatók tiszta pad helyett. A steril doboz egyszerű szerkezetű és könnyen mozgatható. A doboz elején két lyuk található, amelyeket működésen kívül tolóajtók zárnak el. Működés közben kinyújthatja a karját. Az elülső rész felső része üveggel van ellátva a belső működés megkönnyítése érdekében. A dobozban ultraibolya lámpa található, az eszközök és baktériumok pedig az oldalsó kis ajtón keresztül helyezhetők be.
Az aszeptikus műtéti technikák jelenleg nemcsak a mikrobiológiai kutatásban és alkalmazásokban játszanak kulcsszerepet, hanem széles körben alkalmazzák számos biotechnológiában is. Például a transzgénikus technológiában, a monoklonális antitest technológiában stb.
Közzététel ideje: 2024. márc. 06.